糞便隱血試驗(yàn)是檢驗(yàn)技師需要了解的知識(shí)，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜索整理如下：

當(dāng)上消化道少量出血，紅細(xì)胞被破壞，肉眼不見血色，鏡檢不能看到紅細(xì)胞，稱為隱血。檢測(cè)隱血的試驗(yàn)方法稱為隱血試驗(yàn)。

一、方法

（一）鄰-甲苯胺法[原理]血紅蛋白中的亞鐵血紅素有類似過(guò)氧化物酶活性，能催化過(guò)氧化氫放出新生態(tài)的氧，將鄰-甲苯胺氧化為鄰-甲偶氮苯，呈現(xiàn)藍(lán)色。

【試劑】

1.鄰-甲苯胺冰乙酸溶液：取AR級(jí)鄰-甲苯臘150ml，加冰乙酸至lOOOml.可借用血糖鄰-甲苯胺試劑。

2.1mol/L過(guò)氧化氫溶液。

[操作]用竹簽挑取少許糞便于白瓷板、玻片或?yàn)V紙上，滴加鄰-甲苯胺冰乙酸溶液2-3滴，再加過(guò)氧化氫溶液2-3滴，混勻后立即觀察結(jié)果。也可用棉簽涂取少許糞便，然后將鄰-甲苯胺冰乙酸溶液和過(guò)氧化氫溶液直接滴加在棉簽上，立即觀察結(jié)果。

【結(jié)果判斷】

++++：加入試劑后立即出現(xiàn)黑藍(lán)色。

+++：加入試劑后立即出現(xiàn)藍(lán)褐色。

++：加入試劑后初顯淺藍(lán)色，逐漸呈明顯藍(lán)褐色。

+：加入試劑lOs后，初顯淺藍(lán)色漸變?yōu)樗{(lán)色。

-：加入試劑2分鐘后仍不變色。

【注意事項(xiàng)】

1.過(guò)氧化氫易分解失效，要經(jīng)常檢查。方法是將其滴加在血膜上，若逐漸產(chǎn)生較多小氣泡表示有效，否則要重新配制。

2.試驗(yàn)前3天禁食動(dòng)物血、肉、肝及鐵劑、中藥或生食富含葉綠素食物等，以免引起假陽(yáng)性；糞便膿汁中的中性粒細(xì)胞內(nèi)過(guò)氧化物酶也可引起假陽(yáng)性，可將標(biāo)本用生理鹽水制成糊狀煮沸2分鐘，冷卻后再進(jìn)行試驗(yàn)。

3.維生素C等還原性物質(zhì)可干擾過(guò)氧化氫對(duì)顯色物的氧化，引起假陰性。

4.用正常糞便或在其中加入少量溶血液制備陰性或陽(yáng)性質(zhì)控標(biāo)本，每天與待檢標(biāo)本平行測(cè)定進(jìn)行質(zhì)控。試驗(yàn)用具應(yīng)加熱去除污染的過(guò)氧化物酶，避免對(duì)試驗(yàn)的影響。

（二）免疫膠體金試紙法

【原理】

在特制的纖維試紙條上預(yù)包被金標(biāo)記抗人血紅蛋白抗體（Au-Ab1），在檢測(cè)線和控制線上分別固定抗人血紅蛋白抗體（Ab2）和針對(duì)金標(biāo)記抗人血虹蛋白抗體的第二抗體（Ab3）。檢測(cè)時(shí)，若存在人血紅蛋白（Hb），由于滲透作用，將在檢測(cè)線處形成“Ab2-Hb——Ab1-Au”夾心結(jié)構(gòu)，同時(shí)在控制線處形成“Ai—Ab1-Au”，出現(xiàn)兩條色帶，呈陽(yáng)性反應(yīng)；若不存在Hb，則僅在控制線處出現(xiàn)一條色帶。

【操作】 1.取一潔凈干燥載玻片，滴加蒸餾水1-2滴。

2.用竹簽挑取少許糞便，均勻涂抹于蒸餾水中，使成混合液，并讓混合液集中。

3.將糞便隱血檢測(cè)試帶的反應(yīng)端浸入混合液中，5分鐘內(nèi)觀察結(jié)果。

【結(jié)果判斷】

陽(yáng)性：控制線和反應(yīng)線均顯示色帶（即出現(xiàn)兩條色帶）。陰性：僅在控制線出現(xiàn)一條色帶。

無(wú)效：不出現(xiàn)色帶或控制線不出現(xiàn)色帶為無(wú)效，應(yīng)重做試驗(yàn)。

【注意事項(xiàng)】

1.試帶應(yīng)低溫保存，不能冰凍，用前先復(fù)溫。

2.糞便必須多部位多層面采集，尤其對(duì)硬質(zhì)糞便。

3.用蒸餾水涂片。試帶浸入時(shí)不要超過(guò)標(biāo)記線。

4.若糞便外觀呈柏油樣而試驗(yàn)為陰性時(shí)，可能是由于血紅蛋白過(guò)多，出現(xiàn)抗原過(guò)剩（前帶現(xiàn)象），此時(shí)應(yīng)將糞便混合液稀釋后再進(jìn)行檢測(cè)。

（三）方法學(xué)評(píng)價(jià)

1.化學(xué)法是糞便隱血試驗(yàn)的傳統(tǒng)方法，按其試劑的組成成分及操作方法分為普通化學(xué)法和化學(xué)試帶法（將化學(xué)試劑組成成分置于試紙條上）。其原理基本相同，都是血紅蛋白中的亞鐵血紅素具有類似過(guò)氧化物酶的作用，催化過(guò)氧化物產(chǎn)生新生態(tài)的氧，氧化色原顯色，如鄰。甲苯膠法、鄰聯(lián)甲苯膠法、匹拉米洞法、無(wú)色孔雀綠法等。這些方法簡(jiǎn)單易行，靈敏度也能滿足臨床要求，但缺乏特異性和準(zhǔn)確性，此外化學(xué)試劑不穩(wěn)定，久置后可使反應(yīng)減弱。外源性血紅蛋白、肌紅蛋白、植物性過(guò)氧化物酶等均可引起假陽(yáng)性，食入維生素C或其他具有還原作用的藥物可引起假陰性，因此，要求素食3天后，再收集標(biāo)本進(jìn)行試驗(yàn)。

2.免疫學(xué)方法是糞便隱血試驗(yàn)發(fā)展普及最快的方法。通常采用單克隆或多克隆抗體，針對(duì)糞便中的人血紅蛋白或人紅細(xì)胞基質(zhì)，用免疫學(xué)方法檢測(cè)糞便中的隱血，如免疫單擴(kuò)法、酶聯(lián)免疫吸附法、免疫斑點(diǎn)法、免疫肢體金夾心法等。免疫學(xué)方法操作簡(jiǎn)便、快速，特異性好，靈敏度高，因而不需選擇飲食。免疫學(xué)糞便隱血試驗(yàn)方法被認(rèn)為是目前對(duì)大腸癌普查最適用的方法。該類方法主要檢測(cè)下消化道出血，上消化道出血有近50%不能檢出，原因是血紅蛋白被消化酶降解變性或消化而失去抗原性、患者的血紅蛋白抗原與抗體不匹配或者過(guò)量出血而使抗原過(guò)剩等。因靈敏度很高，某些正常人尤其是服用胃腸剌激藥物時(shí)也可出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)。

3.糞便隱血試驗(yàn)無(wú)論用什么方法，均要求多部位多層面采集糞便標(biāo)本，多次試驗(yàn)，以保證檢出率，并區(qū)分出血是間斷性還是持續(xù)性。

二、臨床意義

1.糞便隱血試驗(yàn)對(duì)慢性消化道出血的診斷有重要價(jià)值，該試驗(yàn)陽(yáng)性說(shuō)明消化道有出血，如消化道潰瘍、消化道腫瘤、結(jié)腸息肉、鉤蟲病或藥物性胃粘膜損傷等都可出現(xiàn)陽(yáng)性。

2.糞便隱血試驗(yàn)可鑒別消化道出血病變的性質(zhì)，如消化道腫瘤時(shí)呈持續(xù)陽(yáng)性，而消化道潰瘍出血多為間斷陽(yáng)性。

3.糞便隱血試驗(yàn)常作為消化道惡性腫瘤診斷的一個(gè)篩選指標(biāo)，尤其對(duì)中老年人早期發(fā)現(xiàn)消化道惡性腫瘤有重要價(jià)值。

（責(zé)任編輯：liushengbao）

共2頁(yè),當(dāng)前第1頁(yè)  第一頁(yè)  前一頁(yè)  下一頁(yè)