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檢查方法
實(shí)驗(yàn)室檢查:
口腔念珠菌病的臨床表現(xiàn)多數(shù)為非特異性的,診斷需實(shí)驗(yàn)室檢查確診。由于健康人有帶菌狀態(tài),因此,根據(jù)臨床表現(xiàn)、微生物學(xué)檢查(涂片培養(yǎng)),部分(增殖型)通過活檢綜合考慮十分重要。
1.病損區(qū)及義齒組織而涂片檢查
(1)10% KOH或10% NaOH消化后直接鏡檢:該方法為用竹制刮片刮取病損區(qū)或義齒組織面組織,直接涂片,加10%KOH并輕微在酒精燈上加熱溶解角質(zhì)后,光鏡下查看念珠菌菌絲及孢子。如可見念珠菌特征性的菌絲及孢子,則為陽性,說明念珠菌處于致病狀態(tài),有診斷價(jià)值。如果為假膜型念珠菌感染或義齒性口炎臨床表現(xiàn)典型,涂片陽性則可診斷為念珠菌病。義齒性口炎患者在其義齒的組織面取標(biāo)本,做涂片,比存黏膜上取標(biāo)本陽性率更高。該方法快速、簡便,在臨床上最常用。但缺點(diǎn)為標(biāo)本不能保存,在判斷陽性與否時(shí),受主觀因素較大,存在一定假陽性及假陰性結(jié)果。因此,如果臨床表現(xiàn)不典型,存涂片檢查的基礎(chǔ)上,最好再加上念珠菌定量培養(yǎng)綜合診斷。
(2)涂片固定后染色觀察:在上述涂片后,還可以將涂片固定做革蘭染色或PAS染色,檢查有無念珠菌菌絲及孢子。
2.念珠菌培養(yǎng) 臨床取材培養(yǎng)念珠菌的方法較多,目前常用的方法有唾液培養(yǎng)、含漱培養(yǎng)。取檢應(yīng)盡量快接種,最好定量。
(1)唾液培養(yǎng):方法是收集患者非刺激性混合唾液1~2ml,盡快接種到沙保弱(Sabouraud)瓊脂培養(yǎng)基上,分離培養(yǎng)可得到陽性結(jié)果,并進(jìn)一步做芽管或厚膜孢子實(shí)驗(yàn),鑒別是否是白色念珠菌,有條件可進(jìn)一步用生化方法鑒定。在平皿上尚可計(jì)數(shù),定量培養(yǎng)。該方法簡便,較敏感,且能定量來判斷感染及治療效果。
但極度口干者等唾液流率異常者不適用。
(2)含漱培養(yǎng):方法是讓病人含漱10ml滅菌磷酸鹽緩沖液(pH7.2)1min,收集含漱液,直接接種培養(yǎng)或離心濃縮10倍后接種培養(yǎng)(稱含漱濃縮培養(yǎng))。該方法最敏感,對口干者更為適用。
(3)棉拭子培養(yǎng):為最古老的培養(yǎng)方法,特別適用于病損局限的檢查。但該方法陽性率低,且為半定量,較難判斷是否感染及療效。
(4)其他培養(yǎng)方法:印跡培養(yǎng)方法也較好,特別適用于檢查帶菌。印模培養(yǎng)的方法欠敏感,但可以直觀念珠菌在口腔的分布。臨床較少應(yīng)用該兩種方法,多用于科研。
3.抗念珠菌抗體的檢查 檢測患者血清及唾液中抗念珠菌熒光素標(biāo)記抗體,如果血清抗念珠菌IgG抗體滴度>1∶16,唾液抗念珠菌抗體滴度>1∶1,可作為念珠菌病的輔助診斷依據(jù)。
其他輔助檢查:
對慢性增殖型念珠菌病應(yīng)取活檢,并用PAS染色檢查有無念珠菌菌絲,而且應(yīng)觀察上皮有無異常增生。
念珠菌病的病理改變?yōu)槟钪榫秩虢M織并引起以上皮增生為主的一系列組織病理學(xué)變化。念珠菌在宿主細(xì)胞內(nèi)寄生,在上皮細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)生長。急性念珠菌病如假膜型病損表面有大量菌絲,可有上皮增生,也是機(jī)體的防御機(jī)能所在,通過增生代謝去除有菌絲的上皮。有時(shí)增生與萎縮同時(shí)存在,并有急性或亞急性炎癥反應(yīng),可見明顯的炎性水腫,上皮之間出現(xiàn)廣泛炎性滲出物,有菌絲穿過上皮淺層,并可見中性粒細(xì)胞游出,在上皮淺層聚集形成特征性的微小膿腫。臨床上的白色假膜為壞死脫落的上皮及念珠菌菌絲及孢子。因念珠菌菌絲及孢子中均含有多糖類,因此,PAS染色呈陽性粉紅色。上皮下結(jié)締組織中毛細(xì)血管充血,有炎癥細(xì)胞浸潤,為中性核粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及漿細(xì)胞。
慢性增殖型念珠菌病的病理變化與急性基本相同,可見菌絲侵入上皮淺層,出現(xiàn)微小膿腫,上皮有增生或出現(xiàn)異常增生,較少有上皮萎縮?;啄た捎猩贁?shù)部位被炎癥細(xì)胞浸潤所破壞。炎癥細(xì)胞以淋巴細(xì)胞及漿細(xì)胞為主,在固有層密集,結(jié)締組織中也有慢性炎癥細(xì)胞浸潤,并可見血管擴(kuò)張、膠原纖維水腫斷裂等表現(xiàn)。念珠菌性肉芽腫有時(shí)可見結(jié)締組織的增生。
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