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2012臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試生物化學(xué)知識(shí)點(diǎn)精講6

發(fā)表時(shí)間:2011/11/21 16:15:23 來源:互聯(lián)網(wǎng) 點(diǎn)擊關(guān)注微信:關(guān)注中大網(wǎng)校微信
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臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試生物化學(xué)知識(shí)點(diǎn)精講

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3.dna變性及其應(yīng)用

3.1.dna變性和復(fù)性的概念

在極端的ph值(加酸或堿)和受熱條件下,dna分子中雙鏈間的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開,這就是dna的變性。變性后的dna在260nm的紫外光吸收增強(qiáng),稱為高色效應(yīng)。在dna變性中以dna的熱變性意義最大。dna的熱變性又稱dna的解鏈或融解作用。在dna熱變性過程中,使紫外吸收達(dá)到最大增值50%時(shí)的溫度稱為解鏈溫度,又稱融解溫度tm。tm與dna分子g+c量有關(guān)。

熱變性的dna溶液經(jīng)緩慢冷卻,兩條解鏈的互補(bǔ)單鏈重新締合,恢復(fù)雙螺旋結(jié)構(gòu),即退火。變性dna經(jīng)退火恢復(fù)原狀的過程稱變性dna的復(fù)性。伴隨復(fù)性,dna溶液紫外吸收減弱,稱減色效應(yīng)。

3.2.核酸雜交

復(fù)性是指核酸雙鏈分子中分開的兩股單鏈重新結(jié)合。復(fù)性可以發(fā)生在具有堿基配對的不同來源的核酸鏈之間,形成雜化雙鏈,這一過程稱為核酸雜交,生成的雙鏈稱為雜化雙鏈。核酸雜交技術(shù)(例:核酸探針)是目前研究核酸結(jié)構(gòu)、功能常用的手段之一。

4.rna結(jié)構(gòu)與功能

rna與dna不同,它通常以數(shù)十個(gè)至數(shù)千個(gè)核苷酸組成的單鏈形式存在,但也可以有局部的二級(jí)結(jié)構(gòu)或三級(jí)結(jié)構(gòu)。它比dna分子小,它的功能多樣,種類較多,主要有信使rna(mrna)、轉(zhuǎn)運(yùn)rna(trna)、核糖體rna(rrna)三類。

4.1. 信使rna(mrna):

mrna為線狀單鏈結(jié)構(gòu)??勺鳛榈鞍踪|(zhì)合成的模板。

真核生物:①mrna在5’-端含倒裝的7-甲基三磷酸鳥苷(m7gppp),稱為帽子結(jié)構(gòu)(可避免核酸酶的降解)。②mrna的3’-末端有一段長短不一的多聚腺苷酸polya序列,由數(shù)十個(gè)至上百個(gè)腺苷酸連接而成。3’-末端的多聚腺苷酸結(jié)構(gòu)可增加轉(zhuǎn)錄活性,增加mrna穩(wěn)定性。③5’加“帽”、3’加“尾”屬轉(zhuǎn)錄后加工過程。④分子中有修飾堿基并有編碼區(qū)和非編碼區(qū)。

原核生物:①mrna往往是多順反子②無帽子結(jié)構(gòu)無多聚a尾巴③無修飾堿基。

分子中的每3個(gè)核苷酸為一組,決定肽鏈上一個(gè)氨基酸,稱為遺傳密碼。其特點(diǎn):①三個(gè)相連核苷酸組成一個(gè)密碼子,編碼一個(gè)氨基酸,共有64個(gè)密碼子。②密碼子之間無核苷酸間隔。③一種氨基酸可有多種密碼子。④所有生物使用同一套密碼子。

4.2.轉(zhuǎn)運(yùn)rna(trna):

70至90個(gè)核苷酸構(gòu)成。分子中含有稀有堿基,包括雙氧尿嘧啶、假尿嘧啶和甲基化的嘌呤。

①trna的作用是攜帶相應(yīng)的氨基酸將其轉(zhuǎn)運(yùn)到核蛋白體上以供蛋白質(zhì)合成。

②trna的二級(jí)結(jié)構(gòu)呈三葉草樣。

③trna的三級(jí)結(jié)構(gòu)呈倒l形。

4.3.核蛋白體rna(rrna):

細(xì)胞內(nèi)含量最多的rna,約占rna總量的80%以上。rrna與核糖體蛋白共同構(gòu)成核糖體。rrna由大亞基和小亞基組成。真核生物的核糖體小亞基由18srrna和30多種核糖體蛋白構(gòu)成,大亞基則由5s、5.8s及28s三種rrna與50種核糖體蛋白組成。當(dāng)大小亞基聚合時(shí),可作為蛋白質(zhì)合成的場所。

例題

下列關(guān)于核糖體的組成和功能的描述,正確的是

a.只有rrna b.有轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸的作用

c.由trna和蛋白質(zhì)組成d.遺傳密碼的攜帶者

e.蛋白質(zhì)的合成場所

解析:該題目屬于理解應(yīng)用型,答案選擇e

知識(shí)點(diǎn)三:酶

1.酶的催化作用(重要考點(diǎn))

1.1.酶的分子結(jié)構(gòu)與催化作用

酶是由活細(xì)胞產(chǎn)生,能在體內(nèi)外對其底物起催化作用的一類蛋白質(zhì)。

體內(nèi)多數(shù)酶類屬于結(jié)合蛋白質(zhì)的酶類,分為兩部分,蛋白質(zhì)部分稱為酶蛋白(決定酶反應(yīng)特異性),非蛋白質(zhì)部分稱輔助因子(參與酶蛋白的催化反應(yīng))據(jù)結(jié)合強(qiáng)弱分為輔基和輔酶。

酶分子中與酶活性有關(guān)的化學(xué)基團(tuán)稱為必須基團(tuán),而必須基團(tuán)在空間位置上相對集中形成的特定空間結(jié)構(gòu)區(qū)域,是酶發(fā)揮催化作用的關(guān)鍵部位,稱為酶的活性中心。

例題

酶促反應(yīng)中決定酶專一性的部位是

a.酶蛋白 b.輔基或輔酶

c.金屬離子 d.催化基因

e.底物

解析:該題目屬于識(shí)記型,答案選擇a

1.2.酶促反應(yīng)的特點(diǎn)(高效性、專一性、不穩(wěn)定性、可調(diào)控性)

酶是一類生物催化劑,遵循一般催化劑的基本規(guī)律(例:反應(yīng)前后質(zhì)量不變,只能加速而不能改變反應(yīng))。由于酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì),因而具有一些獨(dú)特的催化性質(zhì):①酶能顯著地降低反應(yīng)活化能,具有極高的催化效率。②每種酶都選擇性地催化一種或一類化合物,具有高度的特異性;③酶是蛋白質(zhì),其空間結(jié)構(gòu)可受到各種理化因素的影響以致改變酶的催化活性,所以酶具有高度的不穩(wěn)定性;④酶促反應(yīng)受多種因素調(diào)控以適應(yīng)機(jī)體對不斷變化的內(nèi)外環(huán)境和生命活動(dòng)的需要。

1.3.酶-底物復(fù)合物

酶在發(fā)揮催化作用前,需與底物密切結(jié)合。這種結(jié)合是酶與底物結(jié)構(gòu)的相互誘導(dǎo)、相互形變、相互適應(yīng)的過程(誘導(dǎo)契合學(xué)說),從而形成酶-底物復(fù)合物。

2.輔酶與酶輔助因子

除了單純由氨基酸殘基形成的單純蛋白質(zhì)作為酶以外,更多的酶需要輔助因子參與作用,通常被稱為結(jié)合酶,其中酶的蛋白質(zhì)部分稱為酶蛋白。根據(jù)輔助因子與酶蛋白結(jié)合成全酶的牢固程度,又分為輔酶和輔基兩類。輔酶為結(jié)構(gòu)復(fù)雜的小分子有機(jī)物,通過非共價(jià)鍵與酶蛋白疏松結(jié)合,可用透析、超濾等方法而分離;輔基則常以共價(jià)鍵與酶蛋白牢固結(jié)合,不易與酶蛋白分離。除了上述輔酶外,酶輔助因子主要是各種金屬離子,如zn2+、fe2+、cu2+、mn2+、ca2+、mg2+、na2+和k+等。

表1-2 酶蛋白與輔酶因子

酶蛋白

輔助因子

物質(zhì)成分

蛋白質(zhì)

非蛋白質(zhì)

結(jié)合特點(diǎn)

一種酶蛋白只能結(jié)合一種輔助因子形成全酶

一種輔助因子可與不同的酶蛋白結(jié)合形成不同的全酶

參與反應(yīng)

催化一定的化學(xué)反應(yīng)

催化不同的化學(xué)反應(yīng)

特性

決定反應(yīng)的特異性

決定反應(yīng)的種類和性質(zhì)

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