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照高效液相色譜法測(cè)定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

用辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液-0.0025mol/L庚烷磺酸鈉溶液-乙腈(2：2：1)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm.理論板數(shù)按嗎啡峰計(jì)算不低于1000.

固相萃取柱系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充物;以測(cè)定法中相同的處理?xiàng)l件和洗脫條件試驗(yàn)。精密量取濃度為每1ml中含0.3mg的嗎啡對(duì)照品溶液1ml，置處理后的固相萃取柱上，同法洗脫，用5ml量瓶收集洗脫液至刻度，搖勻。分別精密量取該洗脫液與含量測(cè)定項(xiàng)下的對(duì)照品溶液各10μl，依次注入液相色譜儀，記錄色譜圖。洗脫液與對(duì)照品溶液色譜圖中嗎啡峰面積的比值應(yīng)在0.97-1.03之間。

測(cè)定法

取固相萃取柱一支，依次用甲醇-水(3：1)15ml與水5ml沖洗，再用pH值約為9的氨水溶液(取水適量，滴加氨試液至pH值為9)沖洗至流出液pH值約為9，待用。取本品20片，精密稱(chēng)定，研細(xì)，精密稱(chēng)取約1片量，置磨口錐形瓶中，精密加5%醋酸溶液10ml，超聲處理20分鐘使嗎啡溶解，取出，放至室溫，濾過(guò);精密量取續(xù)濾液1ml，置上述固相萃取柱上，滴加氨試液適量使柱內(nèi)溶液的pH值約為9(上樣前另取同體積的續(xù)濾液預(yù)先調(diào)試，以確定滴加氨試液的量)，搖勻，待溶劑滴盡后，用水約20ml沖洗，用含20%甲醇的5%醋酸溶液洗脫，用5ml量瓶收集洗脫液至刻度，搖勻。精密量取10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖;另取嗎啡對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，用含20%甲醇的5%醋酸溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含嗎啡0.06mg的溶液，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

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